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細胞外囊泡是一組參與細胞間通訊的異質膜結合囊泡，在質膜（外泌體）或通過內吞作用（外泌體）形成。迄今為止，大多數外泌體研究都集中在體外系統或源自體液的外泌體上，而組織源性的外泌體仍未得到充分探索。在這里，我們提出了一種使用細胞類型特異性啟動子驅動的報告基因構建體的方案，用于靶向標記和隨后從小鼠組織體內特定細胞類型中分離外泌體。由于目前主要基于大小、密度或表面標記的分離技術的局限性，外泌體和外泌體之間的區分仍然具有挑戰性。為了解決這個問題，我們的方法利用基因工程來特異性標記外泌體...

當實驗室里的體外電轉儀突然亮起警示燈或無法正常工作時，許多科研人員的第一反應可能是聯系廠商維修。但其實大部分常見故障都可以通過基礎排查和簡單操作自行解決。掌握這些技能不僅能節省時間成本，更能避免因設備停機影響實驗進度。以下是針對該設備典型問題的系統性解決方案。電源問題是引發故障的常見原因之一。若體外電轉儀無響應，首先要檢查插座是否通電，可嘗試更換其他電器驗證電源接口有效性。部分型號配備獨立保險絲裝置，位于機身背面或底部隱蔽位置，用十字螺絲刀小心打開保護蓋后即可查看。發現熔斷時...

在現代生命科學與生物技術領域，流式電轉染系統猶如一顆璀璨的明珠，散發著耀眼的光芒。它所涉及的技術原理和應用場景，對于許多科研工作者以及相關領域的從業者來說，都有著至關重要的意義。流式電轉染系統的核心在于其巧妙地利用了電場的作用來實現細胞的轉染。當細胞懸浮在特定的緩沖液中時，施加適當的電場脈沖，會在細胞膜上形成微小的孔隙。這些孔隙就像是臨時開啟的“通道”，使得外源物質，比如核酸分子等，能夠進入細胞內部。這一過程看似簡單，實則蘊含著精密的科學設計。電場的強度、脈沖的時間和次數等參...

瘤內免疫療法（ITIT）致力于通過直接刺激腫瘤中的免疫系統來逆轉局部腫瘤介導的免疫抑制，從而產生有效的抗腫瘤免疫。使用體內質粒轉染作為瘤內癌癥免疫療法的白細胞介素12（IL-12）的體內表達進入轉移性黑色素瘤的II期臨床試驗，但臨床成功率有限。我們試圖通過在編碼IL-12的質粒治療中加入表達CD154（CD40配體）的質粒來提高體內IL-12電穿孔的療效，并評估對實體瘤的療效。患有皮內B16F10黑色素瘤或MC38小鼠結腸癌腫瘤的小鼠每周接受2次瘤內（IT）注射編碼IL-12...

突出第一次全面表征永生化T細胞系CTLL-2和HT-2。質粒電穿孔可實現高效且具有成本效益的T細胞工程。用于T細胞電穿孔的優化轉基因啟動子和質粒結構。多功能轉基因遞送策略簡化了T細胞工程工作流程。用于精確T細胞工程的高效CRISPR/Cas9基因組編輯工具包。摘要轉基因T細胞療法最近的臨床成功凸顯了加速T淋巴細胞基礎研究和功能篩選方法的迫切需要。然而，一種簡單且具有成本效益的T細胞高效基因工程方法仍然難以捉摸。目前的方法通常依賴于病毒轉導，這是勞動密集型的，需要嚴格的生物安全...

突出轉基因允許將有益性狀（如抗蟲害和改善營養）引入作物，從而有助于滿足全球糧食需求并提高農業復原力。農桿菌介導的轉化和生物列表學等傳統方法面臨效率低、組織損傷和不可預測的基因整合等問題，這些問題限制了其有效性。納米顆粒通過克服植物細胞壁障礙來提高基因遞送效率和精度。將納米技術與CRISPR/Cas和組織培養方法相結合，可以顯著推進植物基因工程。納米基因遞送可以靶向細胞核、葉綠體和線粒體基因組，而不會造成明顯的組織損傷，從而提高基因修飾的精度和有效性。摘要植物基因工程中的常規基...

體液免疫在建立和維持宿主-微生物群共生以及對病原微生物的免疫力中起著重要作用。然而，鑒定在屏障和全身組織內引發適應性免疫反應的抗原是進一步理解這種宿主-微生物對話的重大障礙。在這里，我們提供了一種方案，通過使用噬菌體（噬菌體）展示介導的抗體/抗原生物淘選來鑒定共生微生物和病原微生物表達的免疫原性蛋白抗原。該程序需要生成M13噬菌粒文庫，生產ORFeome（開放閱讀框總量）噬菌體文庫，然后進行多輪基于親和力的免疫沉淀，隨后通過ELISA、ELISPOT和/或B細胞四聚體生成進行...

在現代分子生物學的實驗室中，有一種看似平凡卻又至關重要的設備，它猶如一位默默耕耘的幕后英雄，在生命科學研究領域發揮著關鍵作用，這就是PCR儀。PCR儀，全稱為聚合酶鏈式反應儀，它的工作原理基于一種能夠在短時間內大量擴增特定DNA的片段的技術——聚合酶鏈式反應。這一過程就像是一場精準的分子復制接力賽。首先，在高溫條件下，DNA雙鏈打開，如同解開一條復雜的繩索，使其分成兩條單鏈模板。接著，在適宜的溫度下，引物與模板DNA的特定序列相結合，這一步猶如為復制過程找到了精準的起始點。然...

在生命科學的廣闊領域中，蛋白質作為生命活動的基石，其結構與功能的解析一直是科學家們追求的目標之一。而要實現這一目標，高精度蛋白晶體培養箱則扮演著至關重要的角色。這不僅僅是一臺設備，更是連接微觀世界與宏觀認知的橋梁，為科學家們揭示生命的奧秘提供了可能。一、蛋白晶體培養的重要性蛋白質是執行生命活動的關鍵分子，從酶促反應到信號傳導，從肌肉收縮到免疫系統的防御，無不離不開蛋白質的參與。為了深入理解這些復雜的生命過程，科學家需要首先了解蛋白質的結構。然而，直接觀察原子級別的蛋白質結構是...

在現代科學研究與生物技術領域，低溫電轉儀扮演著較為關鍵的角色。它并非是那種一亮相便能吸引大眾目光的儀器設備，卻悄然在細胞研究、基因工程等諸多科研前沿陣地發揮著不可替代的作用。低溫電轉儀的工作原理，簡單來說，是利用電場的作用，促使細胞膜的通透性發生改變，從而讓外源物質，比如核酸等大分子，能夠進入細胞內部。而低溫環境在其中有著的意義，它有助于維持細胞內一些結構與成分的穩定性，減少因電轉過程中可能產生的熱效應等對細胞造成的損傷，就如同給整個電轉過程營造了一個相對“溫和”的操作空間，...

在探索生命奧秘的征途中，科學家們不斷發明創造各種工具，以期深入生命的微觀世界。基因導入儀，便是這眾多工具中一顆璀璨的明珠。基因導入儀，從其誕生的那一刻起，就肩負著重大的使命。它猶如一把精準的鑰匙，試圖開啟生物體遺傳信息寶庫的大門。科學家們面臨著如何將外源基因有效地導入到目標細胞中的巨大挑戰。傳統的基因導入方法往往存在效率低下、對細胞損傷大等問題。而設備的出現，為解決這些問題帶來了新的希望。這種儀器的工作原理涉及多個復雜而又精妙的環節。它通過特定的技術手段，將攜帶有目的基因的載...

在現代生物學的廣闊天地里，有這樣一款儀器，它如同一位不知疲倦的“搬運工”，在微觀世界里默默耕耘，將生物大分子精準地送達目的地，為科研探索鋪就了一條條通往未知的道路，它就是流式電轉儀。當我們把目光聚焦到細胞這個微小卻復雜得驚人的世界時，會發現細胞膜就像是一座堅固的堡壘，守護著內部的奧秘。而許多時候，科學家們急需將這些細胞內的生物大分子，比如蛋白質、核酸等轉移出來，或者把外界特定的物質送入細胞內，去探究生命活動的本質規律，這時候它就閃亮登場了。它的工作原理，簡單來說，是建立在電場...